贴壁依赖性细胞是指必须在经过特殊处理的固体基质表面附着才能存活、增殖的动物细胞群体。这类细胞包括原代成纤维细胞、上皮样细胞及
HEK293等传代细胞系，其生长过程涉及
细胞外基质分泌与底物表面特性相互作用。通过TC表面处理技术增强培养器皿亲水性和负电荷密度，可使细胞贴壁效率提升，接触角检测显示优质处理表面水滴接触角≤45°。在
基因治疗领域，该类细胞的贴壁特性直接影响病毒生产工艺选择，微载体技术的应用使其可在三维空间实现规模化培养，单批次
Vero细胞产量可达常规方法的10倍。
根据细胞形态可分为成纤维型与上皮型两大类，二者均依赖
细胞黏附分子与底物的物理化学结合实现贴附。超过80%的脊椎动物细胞具有贴壁依赖性特征，需在经TC处理的聚苯乙烯材质的培养瓶、皿等USP VI级耗材中培养。2024年研究显示，MRC-5二倍体细胞在TC处理表面形成的单层结构，比未处理表面贴附效率提升。
基质表面处理技术通过引入负电荷官能团改变界面特性，使培养器皿表面接触角从普通塑料的90°降至处理后的30-45°，显著增强细胞粘附稳定性。检测显示，
纤粘连蛋白涂层可使HEK293细胞贴壁时间缩短至2小时内。
环境因素中，血清浓度每降低10%会使MDCK细胞贴壁效率下降15-20%，而温度波动超过±1℃将导致Vero细胞脱落率增加30%。2021年实验证实，当搅拌转速超过80rpm时，微载体上的贴壁细胞脱落率可达50%以上。
传统二维培养采用方瓶或转瓶系统，以5×104 cells/cm2密度接种时，Vero细胞可在7天内形成致密单层。2020年基因治疗案例显示，使用40层细胞工厂培养HEK293细胞，比传统转瓶节约80%操作空间，病毒滴度提升10倍。
微载体技术通过Cytodex1（比表面积4400cm2/g）等材料实现三维培养，灌流模式下微载体负载量可达20g/L。在AAV病毒生产中，该工艺使单细胞产量达到260 PFU/cell，较平面培养提升15倍。最新球转球技术实现细胞回收率超70%，突破传统消化转移的损耗瓶颈。
质量控制方面，需定期检测内毒素水平（＜0.25EU/mL）和动物源成分残留，USP VI级耗材的细胞存活率比普通耗材高。2020年规模化生产数据显示，采用自动化生物反应器可使贴壁细胞培养批次间差异控制在±5%以内。