美国驻以色列大使馆是美利坚合众国在以色列的外交代表机构，2018年5月14日由特拉维夫迁至耶路撒冷并正式开馆。现址位于耶路撒冷阿尔诺纳区，原为美国驻耶路撒冷总领馆所在地。

2018年02月23日，美国国务院发言人诺尔特宣布，美国设在耶路撒冷的大使馆计划于5月开馆。

2018年05月14日，美国驻以色列大使馆迁往耶路撒冷。

2018年10月18日，美国国务院宣布，美驻耶路撒冷总领馆将并入美驻以色列大使馆。

2023年10月14日，美国国务院表示，鉴于以色列不可预测的安全局势，已授权美国驻以色列大使馆和美国驻特拉维夫办事处的非必要人员及家属撤离。

当地时间2025年4月9日，美国参议院以53票赞成、46票反对的结果确认迈克·赫卡比出任美国驻以色列大使。

1967年，以色列占领东耶路撒冷后，单方面宣布整个耶路撒冷为其“永久、不可分割的”首都。巴勒斯坦方面则要求建立一个以东耶路撒冷为首都的巴勒斯坦国。

2017年12月6日，美国总统特朗普宣布美国承认耶路撒冷为以色列首都，并将启动将美驻以使馆从特拉维夫迁往耶路撒冷的进程。

2018年2月23日，巴勒斯坦总统府发表声明，警告美国不要一意孤行，将其驻以色列使馆从特拉维夫迁至耶路撒冷。巴总统府发言人鲁代纳在声明中说，美国单方面的行动“无助于实现和平并且没有法律依据”。

美联社说，如何处理美国驻耶路撒冷总领馆问题，成为对拜登政府与以色列本届政府关系的另一项“考验”。

美国现任国务卿安东尼·布林肯今年5月访问拉姆安拉时声明，“美国将继续推进驻耶路撒冷总领馆重开”，但没给出具体日程。副国务卿布赖恩·麦基恩曾在国会参议院听证会上暗示，以方的抗拒可能对重开总领馆构成阻碍。“我的理解是，我方要开设任何外交机构，必须得到驻在国政府的同意。”他说。

美驻以色列外交馆舍因伊朗袭击受损

2025年6月16日，据美国驻以色列大使馆通报，伊朗导弹袭击产生的冲击波致美国在特拉维夫的外交馆舍轻微受损，美方人员无伤亡。美国大使馆公告称，以色列境内的美国使领馆今日（6月16日）继续闭馆，就地避难令仍未解除。

2025年6月17日，美国驻耶路撒冷大使馆关闭。已指示所有美国政府雇员及其家属继续在其住所及附近地区就地避难，直至另行通知。

2025年6月18日至6月20日，美国驻耶路撒冷大使馆关闭，包括在耶路撒冷和特拉维夫的领事部。美国国务院在X上的发文以“安全情势”和“遵守以色列本土战线指挥部的指引”作为关闭的理由。

2025年6月25日，针对美国政府雇员及他们家属的就地避难令已解除，美国驻以色列大使馆开放。

耶路撒冷美驻以色列使馆中断活动

当地时间2025年9月9日，由于也门方向发射导弹，位于耶路撒冷的美国驻以色列使馆被迫中断活动。