deuterium exchange method_化学术语 - 国学百科m.yc-ky.net

deuterium exchange method

化学术语

氘交换法（deuterium exchange method）是化学中用于检测蛋白质动态折叠特性的分析方法。该方法通过监测蛋白质骨架质子与重水中氘的交换反应，揭示其结构特征，尤其适用于α-螺旋构象分析。

简介

是指离子交换法一般用于蛋白质结构检测一般用于测α-螺旋

H/D Exchange Method

Pulsed-Amide H/D Exchange Method

1.Pulsed-Amide H/D Exchange Method

蛋白质骨架上面的质子在未被保护的情况下（暴露在溶剂环境中，不受自身其他氧、氮原子中的孤对电子的影响）会与重水中的氘发生质子交换。

＞N-H + D2O f＞N-H + DOH

蛋白处在开折叠得状态时，发生氕氘交换，之后检测蛋白重新折叠起来的动力学过程。

对于大多数蛋白而言，两端的helices骨架上的60%质子在前20ms的时间内形成折叠，而剩下的40%的质子在接下来的100ms和10s内形成折叠。

实验过程

（A）在蛋白样品中加入变性剂，使得蛋白处在开折叠的状态下，并且使得蛋白中的全部质子交换成氘pD6.0（时间需要3s以上）；

（B）在上述的样品中加入H2O（pH6.0可以是酸性溶剂），稀释变性剂浓度，使得蛋白样品开始重新折叠。

（C）加入H2O碱性溶剂pH 9.0，此时质子交换时间在1ms以内。

（D）当蛋白重新折叠完之后，用NMR或者MS检测蛋白结构

参考资料

药物分子氘代修饰方法研究进展.中国生物医学文献服务系统.2025-02-20

最新修订时间：2025-11-06 16:04

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