白细胞分类是通过显微镜或自动化仪器对血液中中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞进行定量计数的医学检测方法。美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)于2011年提出参考方法,规定需使用EDTA-K3抗凝静脉血制备3张血涂片,玻片应符合尺寸(25mm×75mm)及厚度(0.8-1.2mm)要求,并通过楔形技术制作涂片(推片角度为30° 45°,快速推动形成均匀血膜)。染色需采用Romanowsky类染液。显微镜检查时,通过油镜按“城垛式”方法分析细胞形态特征,每张涂片计数200个白细胞,结果以百分率和绝对值报告,若存在有核红细胞需另行记录。该检测在临床中用于判断感染类型(如细菌性感染时中性粒细胞增多)、过敏反应(嗜酸性粒细胞升高)及血液系统疾病筛查,同时也是环境医学中评估职业暴露(如铅、苯等)的重要指标。
检测原理与方法
显微镜分类法需制备血涂片,采用30°-45°推片角度形成均匀血膜,经Romanowsky类染色后,在油镜下根据细胞核分叶特征及胞质颗粒性质鉴别五类白细胞。每份样本需分析3张涂片,每片计数200个细胞,结果取平均值。自动化仪器法则通过电阻抗法(细胞体积)或多参数联合检测(体积、核形、颗粒)分类,当检测到形态异常时需显微镜复检。
分类标准与形态特征
中性粒细胞分为杆状核(1%-5%)和分叶核(50%-70%)两亚类,胞质含浅粉色颗粒。淋巴细胞(20%-40%)体积最小,核染色质致密。单核细胞(3%-8%)体积最大,胞质呈灰蓝色。嗜酸性粒细胞(0.5%-5%)含粗大橘红色颗粒。嗜碱性粒细胞(0%-1%)颗粒染深紫红色。
临床应用与意义
中性粒细胞绝对值>6.3×109/L提示细菌感染,<1.8×109/L需警惕粒细胞缺乏。淋巴细胞比例>50%常见于病毒感染,异型淋巴细胞增多可能与传染病相关。嗜酸性粒细胞增多(>5%)支持过敏性疾病或寄生虫感染诊断。职业暴露于苯、汞等物质时,白细胞分类变化可作为毒性评估指标。
标准化与质量控制
血涂片需符合25mm×75mm尺寸及0.8-1.2mm厚度要求,推荐使用楔形技术保证细胞均匀分布。染色效果需确保颗粒清晰可辨,否则需重新制片。仪器法则需定期校准,静脉血与末梢血参考区间不同,检测时需注明样本类型。