电泳分析
基于电场作用的混合物分离技术
电泳分析是通过直流电场驱动带电粒子迁移实现混合物分离的分析方法,其分离效率由粒子电荷量、电场强度及介质特性共同决定。该技术自1937年界面电泳建立后快速发展,20世纪60-70年代因新型介质的应用而成为生化分离主流技术。按照分离原理可分为自由电泳(如等电聚焦)和区带电泳(如凝胶电泳),其中区带电泳因支持介质多样化占据主导地位。
技术原理
在直流电场作用下,带电粒子因表面电荷差异产生迁移运动,其迁移率与粒子电荷量成正比,与粒子半径和介质粘度成反比。不同物质因迁移速率差异形成分离区带,此为电泳分离的核心机理。
发展历程
1937年瑞典科学家Tiselius首次建立界面电泳技术,为现代电泳分析奠定基础。20世纪60年代滤纸介质的引入推动了区带电泳发展,70年代聚丙烯酰胺凝胶的应用显著提升了蛋白质分离分辨率。2022年更新的技术标准显示,毛细管电泳已实现纳升级样品的高通量分析。
技术分类
自由电泳
无支持介质的电泳体系,典型代表为等电聚焦电泳
区带电泳
使用固体介质的电泳类型,包含以下主要方法:
关键参数
核心应用方法
双向凝胶电泳(2-DE)
结合等电聚焦(第一向)与SDS-PAGE(第二向),该方法可单次分离数千种蛋白质。在阿尔茨海默症生物标志物研究中,2-DE成功鉴定出12种差异表达蛋白。
毛细管电泳
2022年更新技术标准后,该方法具备以下优势:
免疫电泳
通过电泳迁移率差异分离抗原后,与特异性抗体产生沉淀线。该方法可检测血清蛋白纯度,在单克隆抗体质量控制中广泛应用。
应用领域
根据2025年技术报告,电泳分析在蛋白质组学研究中的使用率达93%,在临床实验室标准化流程中占据21项检测项目。
参考资料
最新修订时间:2025-11-06 04:21
目录
概述
技术原理
发展历程
技术分类
参考资料