悬滴培养
早期细胞体外培养的经典技术
悬滴培养是20世纪初由罗斯·哈里森和亚历克西·卡雷尔创立的组织培养技术,通过凹形载玻片构建封闭环境,利用血浆凝块固定组织切片,实现体外细胞传代培养。该技术解决了早期细胞存活时间短的问题,卡雷尔团队曾宣称维持鸡胚胎心脏细胞存活长达34年。其核心创新在于无菌操作和定期传代,为现代细胞培养技术奠定方法论基础。
历史发展
1907年,美国动物学家罗斯·哈里森为解决神经纤维生长争议,首创悬滴培养法:将蛙胚神经组织固定于淋巴液凝块,倒置于凹载玻片密封观察。1912年,卡雷尔改良此技术,使用鸡血浆与胚胎浸出液混合凝块,通过定期切分组织并转移至新载玻片(传代),实现鸡心脏细胞长期存活。1925年后双盖玻片防污染改进法出现。
技术原理与操作
器材构造:
培养流程:
影响与争议
该技术促使卡雷尔获1912年诺贝尔奖,被誉为“细胞培养之父”。争议源于后续研究指出其34年培养可能因操作污染加入新细胞,但无损其里程碑地位。哈里森-卡雷尔法使疫苗研发摆脱动物宿主限制,直接促成黄热病疫苗等突破。
技术局限性
早期悬滴培养存在细胞生长空间受限、气体交换不足、培养基易液化需频繁更换等问题。观察时容器折光影响显微镜成像清晰度,1928年旋转管培养法逐步替代其主流地位。
最新修订时间:2025-10-18 07:47
目录
概述
历史发展
技术原理与操作
参考资料