可逆抑制作用是指抑制剂通过氢键、离子键等非共价结合方式与酶活性中心的必需基团结合，导致酶活性暂时性降低或丧失的生物化学过程。此类抑制作用具有动态可逆特性，复合物能快速形成与解离，可通过透析、超滤等物理方法去除抑制剂使酶活性恢复。根据抑制剂与底物的结合位点差异，可逆抑制分为竞争性、非竞争性和反竞争性三种类型，典型案例如磺胺类药物通过结构类似性竞争二氢叶酸合成酶的结合位点。
可逆抑制剂通过氢键、离子键及疏水作用等非共价键与酶蛋白活性中心的必需基团结合，形成
酶-抑制剂复合物（EI）。这种结合方式不改变酶的共价结构，仅通过物理作用力降低酶与底物的结合效率或催化能力。
抑制剂与酶的结合过程遵循
质量作用定律，结合强度取决于解离常数（Ki）。当抑制剂浓度降低时，复合物可迅速解离，酶活性随之恢复。
抑制剂（I）与
底物（S）结构相似，竞争结合
酶的活性中心。该抑制作用可通过增加底物浓度来逆转，表现为最大反应速率（Vmax）不变而
米氏常数（Km）增大。典型案例包括：
抑制剂结合于
酶活性中心或活性中心以外的必需基团，以非共价键与
酶蛋白结合。该抑制作用无法通过提高底物浓度消除，表现为Vmax降低而Km保持不变。例如：
抑制剂仅能与
酶-底物复合物（ES）结合，生成无活性的ESI三元复合物。此类抑制导致Vmax和Km同时降低，常见于多底物反应体系中。