再分化是
植物组织培养领域的关键技术环节,指脱分化形成的
愈伤组织在特定培养条件下,通过细胞基因的选择性表达与表观遗传修饰,重新形成器官(如根、茎、叶)或完整植株的生物学过程。其再生途径可分为体细胞胚发生和器官发生两种模式,具体路径选择受植物种类、外植体类型及培养条件等因素影响。该技术作为
植物细胞全能性理论的核心实践,被广泛应用于组培苗繁育、种质保存和遗传转化研究。
再分化属于植物细胞
脱分化后的二次发育过程,其核心是通过人工培养基中的激素配比调控,激活愈伤组织细胞内的特定基因表达程序,使无序增殖的细胞群重新建立极性分布与功能分化。该过程涉及
DNA甲基化、
组蛋白修饰等表观遗传机制的动态调控,直接决定
器官原基的形成位置与发育方向。
实验研究表明,柑橘茎段来源的愈伤组织在添加
6-BA(
细胞分裂素)的培养基中可诱导出不定芽结构,该案例验证了外源激素浓度梯度对
器官发生途径的定向调控作用。
在农业生产中,
芒果、
兰花等
经济作物通过优化再分化条件实现
脱毒苗的规模化生产,可使
病毒病发生率降低97%以上。
转基因研究中,
农杆菌介导的基因转化必须依赖稳定的再分化体系,如2010年建立的
拟南芥叶盘法转化系统,其再生效率可达85%。
截至2022年,针对
水稻、
小麦等
单子叶植物的再生体系仍有技术瓶颈,主要表现为愈伤组织褐化率高(超过40%)和再生周期过长(平均需6-8个月)。
黄学林等学者在《高等植物组织离体培养的形态建成及其调控》中系统阐释了再分化过程中
细胞周期蛋白(如CyclinB)的表达模式,揭示G2/M期转换对器官原基形成的启动作用。
潘瑞炽编著的《植物组织培养》则建立了基于生长素/细胞分裂素浓度比的调控模型,提出当两者比值低于0.5时有利于芽器官分化,高于1.0时则促进根器官形成。
近年研究聚焦于CRISPR/Cas9基因编辑技术与再分化体系的整合应用,通过敲除再生相关抑制因子(如WOX家族基因),可使拟南芥的芽再生率提升2.3倍。光质调控成为新热点,蓝光照射可激活番茄愈伤组织中的光敏色素B,使其
体细胞胚发生率提高68%。