乌克兰国家安全局是乌克兰政府机构，现任副局长为
塞尔盖·纳乌缪克。该机构和平时期的编制为37000人，特殊时期为41000人，其武器使用规范与
乌克兰武装部队现行条例保持一致。
2024年12月，俄武装力量辐射、化学和生物防护部队司令
伊戈尔·基里洛夫中将在莫斯科街头遇袭身亡，乌克兰国家安全局称对袭击负责。
2025年6月1日，乌克兰国家安全局实施代号“蛛网”的特别行动，通过
无人机袭击俄方军用机场，摧毁或损坏数十架战机。
2025年11月29日，乌克兰国家安全局使用海上无人艇在
黑海击中了两艘属于
俄罗斯“影子舰队”的油轮“凯罗斯”号和“维拉特”号，造成严重损坏，无法继续使用，预计将影响俄罗斯石油运输。俄方对此暂无回应。
2025年12月15日，乌克兰国家安全局与
海军实施联合特种作战行动，使用“潜海婴”
无人潜航器攻击俄罗斯新罗西斯克港的一艘636.3型潜艇，乌方声称击伤潜艇导致其爆炸起火并丧失行动能力，俄方则否认受损称破坏企图未得逞。
2025年12月17日至18日夜间，乌克兰国家安全局“阿尔法”特种部队操作远程无人机打击了克里米亚贝尔贝克军用机场的俄罗斯防空设施，并击中了一架处于满挂载状态的米格-31战机、一套“铠甲”-S2防空系统等装备。截至发稿前，暂未看到俄罗斯官方对此作出回应。
2025年12月19日，乌克兰国家安全局特种部队在
地中海“中立水域”用无人机对运输
俄罗斯石油的“影子舰队”一艘油轮发动了袭击。遇袭油轮未装运任何货物，袭击未对周边环境造成威胁。此次行动距离乌本土超过2000公里，乌方表示将继续在“世界任何地点”对运输俄石油的“影子舰队”船只发动袭击。
2025年12月24日，
俄军无人机在
康斯坦丁诺夫卡附近袭击一辆汽车，炸死乌克兰国家安全局一名上校和乌克兰情报总局一名中校，两人均当场死亡。此举是对一名俄方军官惨遭谋杀的回应。
乌克兰总统泽连斯基的顾问卡米申称此次袭击为“历史性的首次”，乌海军发言人普列滕丘克则表示这标志着海战进入“另一个转折点”。
俄罗斯黑海舰队新闻处负责人阿列克谢·鲁列夫声称袭击未成功并发布视频证明，但视频未显示潜艇船尾。爆炸现场被无人机拍摄并公开视频，显示水柱冲天，卫星图像显示码头受损但潜艇受损程度不确定。无人潜航器“潜海婴”造价约24万美元，而636.3型潜艇造价4-5亿美元。
乌克兰国家安全局下属专门单位“第13组”由化名“十三号”的军官领导，负责使用无人装备执行摧毁舰船、追击直升机及战机等任务，已成功摧毁二十多个
俄罗斯海上和空中资产。该小组开发策略以克服俄罗斯防御障碍，如识别并跳跃过吊杆障碍，未来将重点转移至限制俄舰队远距离出海能力。使用的装备包括
无人潜航器“潜海婴”和
无人水面艇“海婴”，其中“海婴”曾攻击油轮，被视为核心资产。
当地时间2025年7月28日，乌克兰总统泽连斯基签署法律，将乌克兰国家局在和平时期的编制由27000人增至37000人，特殊时期编制由31000人增至41000人。法律同时授予安全局人员使用武器及军事装备的权利，其使用规范与乌克兰武装部队现行条例保持一致。