中国仓鼠卵巢细胞(
CHO细胞)是1957年由美国科学家
西奥多·帕克(Theodore Puck)从雌性中国仓鼠卵巢组织中分离建立的成纤维细胞样贴壁细胞系。
CHO细胞源自成年中国仓鼠卵巢活体组织切片,经亚克隆形成CHO-K1等亚系,细胞含量>1×106个/mL,污染检测严格(支原体、细菌、真菌均为阴性)。其
成纤维细胞样形态表现为贴壁生长特性,需在含10%
胎牛血清及1%双抗的培养基中维持活性,冻存液采用90%血清与10%
二甲亚砜混合配方。遗传缺陷表现为L-脯氨酸合成能力缺失,需外源补充以维持代谢。
细胞身份通过STR鉴定确认,培养环境需维持70%-80%湿度,污染控制包括
生物安全柜负压系统和高温灭活废液处理。2024年研究指出,组蛋白H4R3甲基化与DNA甲基化偶联机制影响外源基因表达稳定性,需定期监测
表观遗传修饰水平。
DNA甲基化通过沉默外源基因启动子区域降低蛋白产量,如2023年研究显示甲基化抑制剂5-氮杂胞苷可提升重组蛋白表达效率。组蛋白修饰方面,
丁酸钠诱导的超乙酰化与c-myc基因不稳定性相关,而PRMT5介导的甲基化通过招募DNMT3A调控染色质结构。miRNA调控网络(如miR-2861抑制HDAC5)被用于优化产物质量,2024年实验证实该策略使CHO细胞溶酶体酶活性提高42%。