1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）是一种紫色结晶状有机化合物，其分子结构中的稳定自由基特性使其成为评估物质抗氧化能力的标准试剂。该化合物通过517nm波长处的特征吸光度变化或电子顺磁共振信号衰减反映抗氧化剂的自由基清除能力，检测灵敏度可达微克级。在食品科学领域，DPPH被用于评估甜菜素基指示膜等材料的抗氧化性能；在中药研究中，其应用于黄酮类化合物、蛹虫草多糖等天然产物的抗氧化活性检测。该方法具有操作简便（反应时间30分钟）、适用性广等特点，但需严格控制pH值（6.8-7.2）和避光条件。

作为稳定的氮中心自由基化合物，DPPH在常温下呈现深紫色结晶形态。其自由基稳定性源于三硝基苯基的共轭体系和空间位阻效应，能够在溶液中长期保持未配对电子状态。该特性使其成为检测抗氧化剂清除自由基能力的标准试剂，通过电子转移机制与抗氧化物质发生反应，导致溶液颜色由紫变黄。

在中药成分分析中，DPPH法被用于测定藤茶黄酮类化合物的自由基清除率，实验数据显示其对DPPH自由基的清除率达73.3%～91.5%。蛹虫草多糖在6 mg/mL浓度时对该自由基的清除能力达到峰值。清酱肉多肽抗氧化研究中，5 mg/mL浓度的多肽液对DPPH自由基清除率为57.50%，显著低于同浓度谷胱甘肽的清除效果。

该方法要求将待测样品与0.2 mmol/L的DPPH乙醇溶液按1:1体积混合，避光反应30分钟后测定517nm波长吸光度值。检测体系的pH值需严格控制在6.8-7.2范围，温度维持在25±1℃以保证结果准确性。

2024年研究显示，基于DPPH的检测技术已发展出8种主要方法，其中色谱联用技术（如HPLC-DPPH在线检测法）因兼具高分离效率与活性检测功能，成为主流方法。此技术检测通量可达单次分析30个组分，检出限低至0.1μg/mL，但需承受约15MPa的系统压力。传统紫外分光光度法仍被广泛应用，其通过比色法测定自由基清除率，操作简便但灵敏度相对较低。

电化学法利用DPPH自由基的氧化还原特性，通过电流信号变化反映清除效果；电子顺磁共振法则直接检测未配对电子信号衰减，两者均具有更高的检测特异性。流动注射分析法实现了检测过程的自动化，适用于高通量筛选需求。

DPPH法被用于评估食品包装材料的抗氧化性能，如2022年研究显示含马铃薯淀粉的甜菜素基指示膜对DPPH自由基清除率显著提升。在肉制品保鲜领域，该指标与羟自由基清除率、Fe2+螯合能力等共同构成抗氧化活性评价体系。实验发现清酱肉多肽的DPPH清除效果与其疏水性氨基酸含量呈正相关，推测特定肽段结构影响抗氧化性能。